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　　詳細(xì)分享一下SPE固相萃取的操作步驟

　　SPE固相萃取的過程要求樣品以溶液存在,沒有干擾,而且有足夠的濃度以能被檢測。

　　SPE固相萃取的五步操作步驟對于反相,正相,離子交換萃取過程,一般五步全部都是需要的對于樣品純化過程只需要前三步,步驟一和步驟二如描述的一樣,然而在第三步,分析物將隨著樣品從柱內(nèi)流出被收集,干擾雜質(zhì)則保留在填料上。

　　步:選擇合適的小柱1)如何選擇合適的SPE小柱或者膜片(注建議固相萃取膜片用于大體積樣品,含有大顆粒或處理時需要很高的流速的樣品)大小尺寸的選擇:a,SPE小柱選擇如果您的樣品使用小柱尺寸小于1ml 1ml1ml-250ml,不要求萃取流速3ml1ml-250ml,要求萃取流速 6ml10ml-250ml,高樣品容量10ml/35ml/60ml大于1L,不要求萃取流速10ml/35ml/60mlb,SPE膜片選擇如果您的樣品 使用膜片的尺寸100ml-1L47mm大于1L90mm2)填料量的選擇反相、正相和吸附類型的過程:

　　被萃取樣品的質(zhì)量不超過柱內(nèi)填料量的5%。換句話說,如果您用的100mg/1ml的SPE小柱,分析物的上樣質(zhì)量不超過5mg。離子交換過程:您必須考慮離子交換容量:SAX和SCX的吸附容量約0.2meg/g(1meg=1mmole的+1或-1帶電荷物質(zhì))NH2和WCX填料的離子交換容量需要由具體的應(yīng)用來決定。

　　第二步:活化平衡SPE小柱萃取樣品之前,活化平衡固相萃取填料,用一滿管溶劑沖洗填料,對于膜片則用5-10mla,反相鍵合硅膠和極性吸附介質(zhì),通常用與水互溶的有機(jī)溶劑如甲醇活化,然后用水活緩沖溶液平衡。

　　b,正相類型固相萃取硅膠和極性吸附介質(zhì)通常用樣品所在的有機(jī)溶劑來預(yù)處理。

　　c,離子交換填料用于非極性有機(jī)溶劑中的樣品時,采用樣品溶劑來預(yù)處理。對于極性溶劑中的樣品,用水溶性有機(jī)溶劑來活化,在用一定的PH,有機(jī)溶劑含量和鹽濃度的水溶液平衡。

　　第三步:上樣用移液管或者微量吸液管準(zhǔn)確的將樣品轉(zhuǎn)移到小柱或貯液瓶中,樣品必須以匹配固相萃取的形式存在。

　　第四步:淋洗填料如果您的目標(biāo)物被保留在填料上,使用與溶解樣品相同的溶液,或另外一種不能洗脫目標(biāo)化合物的溶液,去沖洗掉未保留的或不需要的物質(zhì)。通常沖洗溶液不超過一個柱體積,固相萃取膜片需要5-10ml。

　　第五步:洗脫目標(biāo)物用少量能洗脫目標(biāo)化合物的溶液(一般200微升-2ml,取決于柱管的大小,或者5ml-10ml,取決于膜片的大小)去清洗填料,但是要留下在清洗時未洗下的雜質(zhì)。收集洗脫液為進(jìn)一步的分析做準(zhǔn)備。